Phát hành lần đầu tiên vào năm 1995, 3 phần tiếp theo liên tục được sản xuất và lên sóng vào các năm sau đó, tới năm 1999 thì TVB quyết định dừng lại với phần 4 cũng rất thành công, để rồi sang 2003, một nhà đài khác quyết định thực hiện Hồ Sơ Trinh Sát 5 với màu sắc mới, dàn diễn viên mới và những vụ án mới nhưng vẫn đảm bảo được yếu tố hình sự ly kỳ và kịch tính như những gì mà 4 phần gốc từng làm được.
Cốt truyện của Hồ Sơ Trinh Sát 5 được xây dựng dựa trên những bộ phim bom tấn của Mỹ như THE X FILES và CSI, trong khi yếu tố kinh dị và ám ảnh của phim được khai thác một cách tối đa, vì thế nó thực sự không dành cho những khán giả yếu tim, phim khám phá các chủ đề về sự tồn tại siêu nhiên và những bí ẩn chưa được giải thích. Những vụ án được hóa giải thông qua một điều tra viên pháp y, một cựu cảnh sát ngầm và một bác sĩ tâm thần, tất cả mọi người phải làm việc cùng nhau để giải quyết một loạt các trường hợp tử vong bất thường có thể có hoặc không liên quan đến các hoạt động huyền bí.
Hồ Sơ Trinh Sát 5 thuật lại nhiều chuyện có quan hệ đến hồn ma và những cái chết. Nội dung câu chuyện rất ly kỳ, khúc triết, những tình tiết vừa có vẻ bí ẩn, vừa có vẻ ma mị khiến cho khán giả sợ hãi, rùng mình. Từ nhân viên cảnh sát và nhân viên khoa giám chứng, họ đều tận tâm tận lực, triệt để trinh sát, mục tiêu của họ là để tìm ra chân tướng, trừng phạt kẻ có tội, cho oan hồn được yên giấc…